Alnapharm
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Rekombinante Protein Expression

Durch die Verwendung vielfältiger Expressionssysteme, inklusive bakterieller, Insekten- oder Säugetier- Expressionssysteme hat ALNA BIOSCIENCE die Möglichkeit auch schwierig zu exprimierende Proteine im Milligramm-Maßstab zu produzieren.

Unabhängig davon ob Sie sich der Leitsubstanzfindung, Testsystementwicklung, Vakzine-Produktion, Hochdurchsatz-Screening oder der Charakterisierung von Genprodukten widmen wollen, können wir für Sie die Lösung des Problems finden. Wir können für Sie eine breite Palette von Protein-Expressions-Systemen in hoher Qualität mittels bakterieller, Hefe-, baculovirus-/
Insektenzell-, sowie Säugetierzell-Systeme bereitstellen und im Klein-
bis Großmaßstab realisieren.

E. Coli Expression

  • Transformation des Expressionsvektors in E.coli
  • Screening und Selektion von positiven Klonen
  • Evaluation der Expression durch SDS-PAGE or Western Blotting
  • Optimierung der Wirtszellen im Kleinmaßstab und Analyse in verschiedenen E.coli-Wirtsstämmen.
  • Wachstums- und Expressions-Optimierung durch verschiedene Induktionsmittel, Temperatur, Zelldichte, Kultivierungszeiten, Antibiotika, und Medien, um geringe Produktivitäten und unlösliche Proteinaggregate zu vermeiden.
  • Isolierung und Präparation von Inclusion-Bodies
  • Zellernte und Aufschluss

Baculovirus Expression

  • Transfektion von Insektenzellen, sowie Synthese und Bereitstellung von rekombinanten Insektenviren. Virusproduktion und Plaque-Reinigung
  • Versuchsexpression mit rekombinanter Virus-Klonen
  • Vervielfältigung und Reinigung von rekombinanter Baculoviren.
  • Virus Titer-Bestimmung und Bereitstellung von hochtitrigen Virus-Stamm-Mengen
  • Expressions-Optimierung von Sf9 oder HiFive Zellen bei verschiedenen Temperaturen, MOI, Wachstumsbedingungen, Medien,
  • Löslichkeitsbestimmungen
  • Massenkulturen und Proteinreinigung
  • Zell- bzw. Biomasse- Gewinnung ( auch aus konditionierten Medien) und Aufschluss- bzw. Lysat-Präparation
  • Hochdurchsatz-Screening Ihrer Plasmid-Konstrukte nach Ihren Auswahlkriterien
  • Produktion von hochtitrigen Virusmengen schon in einer Woche

Großfermentation

  • Hochdichte-Zellproduktion vom Schüttelkolben bis zum Bioreaktor
  • Zellgewinnung durch Durchfluss- und/oder Hochgeschwindigkeits-Zentrifugation
  • Niedertemperatur-, schaumfreie Hochdruckdispersion für Zellaufschluss bzw. Lysesystem

Leistungsdaten für die verwendeten Expressions-Systeme

System Kapazität
Bakterien
  • Bereitstellung von transformierter Bakterienbiomasse (feucht) bis zum 3-Tonnenmaßstab
  • Bereitstellung homogener rekombinanter Proteine mit b > 98 % Reinheit, für die Kristallisation sowie
  • partiell gereinigter rekombinanter Proteine mit > 70 % Reinheit.
Hefe
  • Bereitstellung von transformierter Hefebiomasse für die Grobfermentation bis in den 3Tonnen-Maßstab
  • Bereitstellung von homogener rekombinanter Proteine mit Reinheit > 98 %, z.B. für die Kristallisation
  • Bereitstellung teilweise gereinigter Protein mit einer Reinheit von > 70
  • Bereitstellung von Großmengen an Protein, bis zu 1 kg
Baculovirus-Insektenzellen
  • Bereitstellung von hochtitrigen rekombinanter Virus-Mengen mit bis zu n109 pfu/ml, welche das gewünschte Kunden-Gen enthalten
  • Bereitstellung homogener rekombinanter Protein mit Reinheit > 98 %; z.B. für die Kristallisation
  • Bereitstellung teilgereinigter Protein mit einer Reinheit > 70 %
  • Bereitstellung von Großmengen an Protein, bis zu 1 kg
  • Bereitstellung einer Option zur Herstellung von Proteinen bis zum Maßstab 500 Liter für Insektenzellen im Wave-Mixer System
Säugerzellen
  • Bereitstellung eines einzigen Systems zur Herstellung von endgereinigten homogenen Proteinen von der Gen-Synthese bis zur Expression und Aufarbeitung im Auftrag bis zu 100 mg.
  • Durchführung von flüchtiger Expression der Kunden-Proteine bis zu 10 mg in 10 Tagen. Bereitstellung konditionierter Medien und Zellpellets von stabilen Zellen aus bis zu 300 Liter Kulturvolumen bei Einsatz eines zellschonenden „wave mixer system“.

Produkte fürs Leben

Die ALNA-BIOSCIENCE macht das Leben zum Mittelpunkt ihrer Forschungsarbeit. We make Science live ist der ambitionierte Leitspruch des Unternehmens und treibt es voran...

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